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【课题实验整体外包】-造血干细胞移植于成年的免疫缺陷小鼠

造血干细胞经静脉注射入射线照射建立的免疫缺陷小鼠,HSC须去除T细胞以减少移植物抗宿主的免疫反应。成功的HSC移植可在小鼠体内重建人的免疫造血系统。操作过程如下:

将5~12周的NOG或NSG小鼠放入消毒的有过滤器的容器中。用240cGy的射线照射小鼠(137Cs射线源)。4~24小时内注射人HSC。照射小鼠可以杀死小鼠HSC,为注射人HSC的移植提供方向。准备人脐带血细胞,用CD3抗体磁珠结合和清除 CD3+T细胞。将含有3×10000/CD34+的0.5ml PBS缓冲液HSC细胞通过小鼠尾静脉注入。让人HSC在小鼠体内维持10~12周,这段时间人HSC细胞将逐步生长分化产生人的T和B细胞。注射HSC 4周后将可检测人CD45+细胞,表明已成功地在小鼠体内重建人的免疫系统。

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