(1)复制方法  白色念珠菌接种于沙保氏培养基，在28℃下培养3d，用1ml生理盐水冲洗菌面，液体转入研磨器研匀后稀释，红细胞计数器计数接种浓度为10000000CFU/ml。体重为1.5～2.5kg成年家兔，经耳缘静脉气栓处死一半兔，无菌条件下摘除眼球，制备带有2mm巩膜环的角膜植片。放入无菌甘油中冷冻待用。实验前3d，用0.5％氯霉素眼药水滴眼，每天4次。实验前用盐酸氯胺酮(50mg/kg体重的剂量)、盐酸氯丙嗪(10mg/kg体重的剂量)、硫酸阿托品(0.015mg/kg体重的剂量)的混合液，肌肉注射，麻醉动物。用2％利多卡因2ml眼球后注射麻醉角膜。无菌条件下，将上述角膜植片常温下生理盐水浸泡10min后，用5号手术刀轻轻刮除受眼角膜上皮，用10-0尼龙线将供体角膜植片放射状缝合于受体角膜的周边，然后用注射器将0.1ml菌液注入植片与植床角膜层间中央。用庆大霉素2万U结膜下注射，红霉素眼膏涂眼。术后用0.5％氯霉素眼药水点眼，每天4次，于手术后48h取下角膜植片。在接种第2日即可观察到典型的角膜真菌病变。

(2)模型特点  用角膜表层镜片术，在角膜植片及植床间接种真菌，不依赖皮质类固醇激素，即可建立兔角膜炎模型。角膜植片以缝线固定，其层间空间稳固，保证了真菌与创伤角膜表面的充分接触，创造了适合真菌生存繁殖的良好环境，因此所需的真菌菌液量相对较低，其感染成功率高，可重复性较好，角膜植片容易得到，不会产生交叉感染；但是此方法操作过程相对复杂，对实验者的手术技术水平有一定的要求。在接种第2日即可观察到典型的角膜真菌病变，白色念珠菌菌丝垂直于角膜板层生长，圆形孢子散在生长。在接种8d病变标本中菌丝生长至角膜中深基质层。真菌性角膜炎的发病与致病菌种、真菌毒力、机体免疫状态及真菌数量等都有关系。用角膜镜方法不仅可建立白色念珠菌引起的角膜炎，还可建立烟曲霉菌、茄病镰刀菌、黄绿青霉菌等不同菌种的角膜炎模型，虽然引起病变的程度有差异，但感染成功率高，容易重复。

(3)比较医学  真菌性角膜炎(fungal keratitis, FK)是一种高致盲率的感染性角膜病，严重者甚至丧失眼球。国外有研究报道，应用远交系NIH Swiss小鼠和近交系BALB/c小鼠均成功建立了真菌性角膜炎动物模型。但由于小鼠角膜很小，进行手术操作困难，感染后可取材的标本较少，且不利于真菌感染大体形态学的观察。目前，大部分眼部真菌感染研究中，最常应用兔作为模型动物。由于兔角膜较人角膜大，容易对其进行手术操作和局部观察，且可以获得较多的实验标本。迄今全球已发现70余种真菌可引起角膜感染，其主要致病菌种在不同地区差别较大，主要致病菌种有白色念珠菌、镰刀菌和曲霉菌。角膜真菌感染动物模型传统的制备方法为角膜基质注射法，通过注射器将预制真菌菌液注入动物角膜中央基质层内，但这种动物模型与真菌性角膜炎临床病例自表面感染的自然病程并不相同。为了提高感染率和维持持续感染，有研究者接种真菌前，尚在动物结膜下注射皮质类固醇激素，此种模型主要用于真菌性角膜炎药物疗效和诊断方法的研究。自上世纪末国外学者发明了角膜接触镜法，先完整刮除兔角膜中央上皮，再盖上软性角膜接触镜，然后在接触镜与角膜层间注入白色念珠菌菌液，此造模方法类似于人角膜感染的病程，可应用于念珠菌性角膜炎的病理学组织学研究。本模型采用角膜表面镜片术法复制家兔角膜炎模型，与其他方法复制的模型相比本模型更接近临床上真菌性角膜炎的自然病程。