动物实验技术
小鼠灌胃方法比较简单,需要关注的只有两点:一是要保持小鼠的头部和颈部成一直线,方便灌胃针头进入,二是动作要轻柔,从口角进入,防止损失食道。做的多了自然就熟练了。
具体操作过程如下:
1.准备灌胃针头。一般可以从市场上面买到,实在没有的话,可以用12号的针头,剪去针尖,用砂纸将头端磨平,也可以用。但是买的灌胃针头的头端用锡或者适宜的方法处理了针头的锐口,自己用砂纸不可能将所有的锐口都磨掉,用这样的针头灌胃,损失小鼠食道的可能性比较大。
2.抓住小鼠,使其头、颈和身体呈一直线。抓小鼠的动作很简单,左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴,另外三个手指抓住小鼠的颈部即可。因为小鼠始终在活动中,若一次抓的感觉不是很顺手,要放开重新抓,不要逞强进行下一步操作。
3.抓好小鼠就可以灌胃了,一般用1 ml的注射器配灌胃针头。灌胃针头从小鼠的嘴角进入,压住舌头,抵住上颚,轻轻向内推进,进入食管后会有一个刺空感,进入食道后就可以推注药液了。(我认为,所谓的灌胃,不必要灌胃针头进入小鼠的胃部,进入食管后就可以推药了,这样对小鼠食道的损伤要小点,特别是要长期灌胃给药的情况下。)当然,灌胃针头也可以再往里面深入一点,防止药液从口中流出。
4.灌胃容积一般是0.1~0.2 ml/10 g,最大0.35 ml/10 g,每只小鼠的灌胃最大容积不超过0.8 ml。
经验总结
1.在操作过程中最重要的是小鼠的固定。把小鼠放在笼子上,右手捏住它的尾巴,它会扒住笼子伸长身体,然后左手拇指和食指捏住它颈部皮肤(不用太用劲,保证它不能回头就行),其余三指抓住背部,就可以把它固定住了。注意头一定要固定好,头和躯体要保持一条直线,并且灌胃时使小鼠成竖直位,头向上。
2.我们用的灌胃剂量是0.2 ml/10 g。开始时试过0.1 ml/10 g,灌完后小鼠立即俯卧喘息,大概是撑着了,后改用0.2 ml/10 g,灌完后小鼠没有明显不适。
3.把握要领,动作尽量迅速,减少小鼠的不适感。
4.小鼠灌胃剂量:0.1 ml/10 g体重,也就是说,一只20 g的小鼠,一般一次灌胃0.2 ml。
5.灌胃的方法与技巧对了,一般不会有问题。比如说抓小鼠的姿势(小鼠的身体最好伸展在一条直线上,不能让它乱动,要固定);还有,一定要用灌胃针灌胃(灌胃针的针尖部分是弯曲的);另外就是技巧上的问题了,进针时要从小鼠的嘴角进去,进去后让灌胃针顺着小鼠的上腭压着它的舌头进入食道,这当中会有种突破感,突破感过后就畅通无阻了,液体灌进去一点阻力也没有,若有阻力的话,那就说明你灌错地方了,取出灌胃针再来过,多练几次就熟练了,这还是很好练的。祝你好运!另外,灌胃的动作不能太粗鲁,一定要轻柔!
6.20 g 的小鼠灌胃一天一次,只要操作得当不会被灌死。灌胃针可用12#注射器针头,磨平尖端,点焊为钝圆形.也有卖的灌胃针,如苏州市苏杭实验动物设备厂(0512-65621455)。
7.操作前将灌胃针安在注射器上大致测量一下从口腔到胃内的位置(最后一根肋骨后缘)的长度,根据此距离确定插入深度,成年小鼠插入大约3厘米。成年小鼠每次最大可灌1.0毫升。
8.最重要的是手法,感觉和熟练程度。固定好小鼠,身体最好伸展在一条直线,太松会动,太紧就把小鼠脖子勒住了。一般沿口角进针,抵达咽部会有抵触感,小鼠会有吞咽动作,此时阻力丧失,就可继续下行了。
刚开始几天难,往后就容易了,人熟练了,小鼠也习惯了。
小鼠灌胃具体操作
(本文转载丁香园)
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