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【课题实验整体外包】-Mfge8基因敲除纯合子小鼠的定向繁殖和鉴定及其与自身免疫疾病相关性分析

目的:繁殖和鉴定 Mfge8基因敲除C57BL/6小鼠,获取纯合子(Mfge8-/-)小鼠,并比较 Mfge8-/-小 鼠血清学及组织学改变。

方法:对幼鼠剪尾抽提基因组DNA,用PCR法和琼脂糖凝胶电泳法鉴定幼鼠基因型;利 用TUNEL法分别检测12周龄野生型(WT)和 Mfge8-/-小鼠肺组织中凋亡细胞;并且利用免疫荧光法分别检测36 周龄WT和 Mfge8-/-小鼠血清中ANA和AECA含量。

结果:构建的基因敲除小鼠已成功繁育保种,并得到纯合基 因缺失型小鼠。 同时,12周龄Mfge8-/-小鼠肺组织中凋亡细胞数量明显多于WT小鼠;36周龄Mfge8-/-小鼠血清中 ANA抗体及AECA抗体阳性,而WT小鼠血清中呈现阴性。

结论:C57BL/6背景小鼠敲除 Mfge8基因后,更易发 生自身免疫疾病。

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